|
||||
|
||||
Введение Даже при отсутствии лечения период клинической латентности при инфекции ВИЧ может быть достаточно продолжительным. Несмотря на это, в организме ВИЧ-инфицированного человека высокими темпами идут процессы образования новых вирусных частиц и разрушения CD4+ Т-лимфоцитов, что приводит к возникновению СПИДа (1, 2, 3). Абсолютный уровень виремии плазмы в стационарном состоянии ("вирусная нагрузка ") является достоверным предсказательным фактором скорости прогрессии заболевания и в сочетании с содержанием CD4+ T-лимфоцитов имеет огромное прогностическое значение (4-6) (Рис. 1). Определение вирусной нагрузки в плазме крови широко используется для мониторинга изменений виремии в ходе антиретровирусной лекарственной терапии, причем именно этот показатель является наиболее ценным маркером эффективности антиретровирусных препаратов, более ценным, чем изменение содержания CD4 T-лимфоцитов (4, 5, 7-9). В связи с этим разработаны многочисленные подходы и методы анализа для количественного определения ВИЧ-1 РНК. В настоящей публикации мы описываем три наиболее широко применяемых коммерческих метода определения вирусной нагрузки. Рассматриваются характеристики методов, которые делают их предпочтительными для применения в той или иной клинической ситуации (Таблица 1). Анализ Quantiplex (bДНК) Описание метода Важным преимуществом этой стратегии амплификации сигнала является возможность избежать ошибок количественного определения последовательности нуклеиновой кислоты, связанных с экстракцией и амплификацией. В сравнительных исследованиях с методами, основанными на амплификации мишени, метод Quantiplex ВИЧ-1 РНК часто дает лучшую воспроизводимость (13-16), особенно в области более низких значений в динамическом диапазоне. Кроме того, присутствующие в плазме вещества и антикоагулянты, такие как гепарин, которые могут подавлять реакцию ОТ-ПЦР (см. ниже), не оказывают отрицательного влияния на определение по методу bДНК. Олигонуклеотидные зонды, использующиеся в анализе по методу bДНК, одинаково хорошо связываются с субтипами А-F группы М ВИЧ-1 (11), что позволяет проводить измерения вирусной нагрузки разных штаммов ВИЧ-1. Недостатки определения с помощью метода bДНК включают отсутствие внутреннего количественного стандарта для каждого образца и потребность в относительно больших объемах образца (по крайней мере, 1 мл плазмы крови), что может создавать проблемы при ограниченном объеме образца, например, при анализе материала от маленьких детей. далее
|
||||
@ 2007 СТОП_СПИД!
|